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细菌RNA内切酶加工gRNA阵列实现酵母多重基因组编辑和调控

来源:生物催化剂设计与改造服务 日期: 2018年01月03日

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?CRISPR技术大大加速了菌株工程领域。然而,在酿酒酵母中所做的鲁棒的多重基因组编辑工具努力还是不够的。本研究利用来自铜绿假单胞菌的RNA内切酶Csy4(Csy4是CRISPR家族的一个Cas9的同源蛋白,有时也被称为Cas6f,具有核酸内切酶的功能)的RNA加工能力,从单一转录产生多种gRNA用于酿酒酵母中的基因编辑和基因干扰。在基因组编辑方面,实验进行了FAA1,,FAA4,POX1和TES1的四重删除,其中有24个克隆的效率达到了96%。随后,利用这一系统有效的调节OLE1,HMG1和ACS1这3个基因的转录。因此,本实验证明利用来自铜绿假单胞菌的Csy4能够有效地实现符合基因编辑和基因调控。